[자연과학] Enzyme Activity의 측정(測定)
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작성일 20-07-12 17:33
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Enzyme Activity의 측정(measurement)
1. 실험headline(제목) : Enzyme Activity의 측정(measurement)
2. 실험일시 : 2009. 10. 29
3. 실험목적 : 단백질을 분리해 나가는 과정 중에 원하는 단백질이 얼마나 잘 분리 되었는가를 알아보기 위해서는 단백질의 함량과 생물학적 활성을 측정(measurement)합니다. 탁도 變化(변화)는 450㎚에서의 현탁액의 흡광도를 측정(measurement)함…(省略)
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실험결과/기타
다.
4. 재료 및 기구 :
① ion chromatography 실험에서 분리 과정마다 추출해낸 5 가지의 시료와 튜브
- sephadex에 계란 흰자 넣어 chromatography한 20ml (흰자여과액)
- 10ml에 TE buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (Tris 1용액)
- 10ml에 TE buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (Tris 2용액)
- 10ml에 탄산 buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (탄산 1용액)
- 10ml에 탄산 buffer 10ml 처리 후 chromatography한 20ml (탄산 2용액)
② 피펫(10㎖, 200㎕)
③ Cuvette
④ Spectrophotometer
⑤ Tris-EDTA(TE) buffer, 0.05M
⑥ Phosphate buffer, 0.1M (0.2M sodium phosphate monobasic, 0.2M sodium phosphate dibasic)
5. 실험theory 및 원리 : 달걀흰자의 lysozyme은 세균의 세포벽을 가수분해 시킵니다. 따라서 lysozyme에 의해 쉽게 용해되는 Micrococcus lysodeikticus의 현탁액을 효소와 반응시켜 현탁액의 탁도가 감소하는 정도를 측정(measurement)함으로써 lysozyme 활성을 측정(measurement)합니다. 또 비활성도를 측정(measurement)하여 단백질의 분리 정도(순도)를 알아보는데, 이 과정이 바로 Enzyme Activity의 측정(measurement)입니다.
